接上期内容，本篇文章将继续学习肝脏和肠胃道（GI)腔道肿瘤和良性病变鉴别诊断的免疫组化（IHC）标记物， 涵盖了胰腺、肝脏和胃肠道正常、良性病变和肿瘤性改变的组织，以及新的诊断标志物和分子生物标志物的应用。
肝细胞和胆管细胞标记物
这两种细胞具有不同的免疫特征。肝细胞分化在两个水平上决定：(1)在细胞学水平上，肝细胞分化的细胞表达Arginase-1、HepPar-1和CK 8/18，白蛋白RNA ISH呈阳性。(2)在结构水平上，肝细胞分化的证据是存在小管结构，可以通过免疫组化染色多克隆CEA、villin、CD10和BSEP检测出来。TTF-1（8G7G3/1）可识别增生性的细胞。恶性肝细胞也表达AFP、Glypican-3、GS、HSP70。胆管细胞没有特异性标记物，可表达CK7和CK19，白蛋白RNA ISH阳性。
在肝肿瘤的诊断中，通过组织形态学来区分肝细胞癌（HCCs）和肝内胆管癌（iCCAs）有时是具有挑战性的。最近的一项研究报道，CRP诊断iCCAs的敏感性为75.7%，特异性为91.1%。另一种新的标记物HNF-1β表现出更好的性能，敏感性为100%，特异性为92.31%（图2，A到I）。但是要注意的是，此应用仅限于原发性肝肿瘤的检查，因为HNF-1β在其他多种肿瘤中也有表达，如卵巢透明细胞癌、子宫内膜癌、结直肠癌（CRCs）、透明细胞肾细胞癌、卵黄囊瘤、PDACs和尿路上皮癌。HNF-1β在诊断iCCAs成分和识别肝细胞-胆管合并癌中iCCA成分方面是比CRP更敏感和特异性的标志物。在原发不明的腺癌病例中，HNF-1β表达缺失可用于排除iCCA，表1列出了肝细胞和胆管细胞的标志物。
图1 HNF-1b在鉴别肝细胞癌(HCC)和胆管癌(CC)中的应用
在非肿瘤性肝组织中，肝细胞中存在非常微弱和不均匀的核阳性。相比之下，天然胆管中的胆管细胞和小管反应被HNF-1b免疫染色强烈而弥漫性地标记(A)。在中度分化的HCC中，肿瘤细胞对HNF-1b的核免疫反应最小(B和C)。在低分化的HCC中，肿瘤细胞对HNF-1b的核免疫反应弱且不均匀(D和E)。在高分化的CC中，肿瘤细胞表现为均匀，弥漫性，在中度分化的CC中，肿瘤细胞核弥漫性染色，HNF-1b呈强阳性(H和I)(原放大倍数310 [A至I])。
肝窦内皮细胞的标记物
肝窦内皮细胞（LSECs）具有独特的免疫图谱：它们强烈表达巨噬细胞标记物（CD4、CD14、CD16、CD31、CDw32 [FcRII]、ICAM-1），但很少表达CD34或Factor VIII。ERG呈阳性，Vimentin和D2-40呈阴性。在良性和恶性肝脏疾病中可见血管重塑后，LSECs发生毛细血管化，并在免疫表型和功能上转化为经典的血管内皮细胞，这有助于两者的诊断。
用于与常见胆汁淤积性肝病相关的导管反应的鉴别标志物
胆汁管反应常见于胆汁淤积性肝病。使用一组标记物如CD56、EMA和CD10，可能有助于区分可能的病因。在暴发性肝衰竭和肝硬化中，肝小管CD10、CD56和EMA染色呈阳性。在自身免疫性胆管损伤中，如原发性胆道胆管炎和原发性硬化性胆管炎，肝小管表达CD56，但不表达EMA或CD10。当胆道系统受阻时，肝小管表达EMA，但不表达CD10或CD56。
肝细胞腺瘤分类的标记物
2019年WHO消化系统肿瘤分类将肝细胞腺瘤（HCA）分为4种类型：HNF1α突变、炎症性、β-Catenin激活型和未分类型。最近组织形态学的发展和分子数据的大量积累使HCA的亚分类更加准确（表2）。请注意，在HCC中，16%-25%的病例中LFABP的表达可能丢失。因此对血清淀粉样蛋白A（SAA）和CRP免疫染色结果的解释需要更加谨慎。特别是，它们不应该作为某种特定类型的腺瘤是HCC潜在前体的特异性特征，因为它们也可以在HCC中检测到。局灶性结节性增生中也可见CRP和SAA的表达，这有时是一个更重要的诊断挑战，因为局灶性结节性增生通常是炎症性肝腺瘤最重要的形态学特征。此外，SAA和CRP也可在肝硬化结节中表达。对于音猬因子激活的HCA标记物，ASS1通常比PTGDS更敏感。
食管内肠上皮化生的标记物
Barrett食管粘膜免疫染色标记物的应用通常是有争议的，不推荐用于临床实践。据报道，特化杯状细胞CK7、villin、SOX-9、HepPar-1、Das1和CDX2呈阳性。值得注意的是，胃心脏粘膜有时也可呈villin阳性。
Barrett食管反应性异型性和不典型增生的鉴别标志物
目前还没有敏感和特异性的标志物来诊断Barrett食管的发育不良。细胞学和组织结构的改变仍然是最佳的诊断标准。一些作者认为p53异常表达、P504S阳性和IMP-3（KOC）过表达有助于区分。对p16和Ki-67免疫染色的尝试显示了一些阳性结果，但还缺乏广泛的验证。
胃腺癌的预后标志物
目前国家综合癌症网络指南（胃癌，v2.2022）将HER2过表达/扩增、PD-L1表达、微卫星不稳定性、高肿瘤突变负担（>=10突变）、Epstein-Barr病毒阳性和NTRK基因融合作为靶向预后标志物。约20%的胃癌和胃癌有HER2/neu过表达和/或扩增。Claudin 18.2可显著延长晚期胃癌患者的生存期。虽然E-钙粘蛋白的缺失还不能作为胃癌的预后标记物，但它对胃癌的预后有影响。但E-钙粘蛋白缺失既不是HDGC筛查的敏感标记物，也不是特异性标记物。对于疑似HDGC病例，应建议进行遗传咨询和检测。
用于鉴别与阑尾常见良性腺增生性病变的标志物
在反应性增生中，阑尾上皮细胞表达CK20、CDX2、SATB2和可变的CK7。当缪勒氏源性腺体增生存在时，上皮细胞表达ER和PAX8，如子宫内膜异位症和输卵管内病变。子宫内膜异位症间质细胞CD10染色阳性。子宫内膜异位症患者的上皮细胞可发生粘液性上皮化生，CK20阳性。输卵管内腔增生可表现为上皮细胞中WT-1可变表达，但Calretinin阴性。良性间皮细胞可形成囊性结构，特别是在阑尾系膜。间皮囊肿的内壁细胞WT-1和Calretinin均呈阳性。
杯状细胞腺癌、经典神经内分泌肿瘤和常规阑尾腺癌鉴别的标志物
阑尾杯状细胞腺癌（GCA）肿瘤细胞可呈IHC双表型：它们强烈表达肠上皮细胞标记物，包括CEA、CK7、CK20、SATBS、MUC2和CDX2，也可不同程度地表达神经内分泌标记物，如INSM1、CD56、突触素和嗜铬粒蛋白。阑尾神经内分泌肿瘤细胞则相反：它们表达了不同数量的上述肠上皮细胞标记物，但始终强烈表达神经内分泌标记物。常规阑尾腺癌表达肠上皮细胞标志物，但不表达神经内分泌标志物。
阑尾和卵巢来源的粘液性肿瘤的鉴别标志物
在IHC染色中，阑尾粘液腺癌表达肠道标志物包括CK7、CK20、CDX2、SATB2、β-Catenin（核和膜阳性）和MUC2。CDH17在GI腺体中有明显的细胞膜和细胞质表达。CDH17在结肠直肠癌（包括阑尾癌）、胃癌、胰腺癌和胆管癌中表达。卵巢黏液性癌肿瘤细胞对肠道细胞标记蛋白具有不同的免疫反应性，但不表达SATB2、MUC2或CDH17。卵巢黏液性肿瘤中 CK7通常呈弥漫性阳性，而CK20和CDX2通常呈局灶性或斑块性阳性。相比之下，CDX2和CK20在大多数阑尾癌中均呈弥漫性阳性，CK7呈可变阳性。另一方面，它们表达PAX8（20%-30%）和WT-1，这可以进一步有助于区分。它们中β-Catenin表达也几乎总是阴性，提示其分子发病机制与阑尾粘液腺癌不同。
Her-2染色在结直肠癌中的应用
与胃癌和乳腺癌相比，结直肠癌（CRC）中HER2阳性的诊断标准尚未完全标准化，并且在不同的研究中存在差异，这些有争议的结果提示HER2在结直肠癌中的作用有待进一步探讨。
GeneTech-SH
基因科技相关抗体信息
参考文献
Huang J, Chen G, Li H. An Update on the Role of Immunohistochemistry in the Evaluation of Pancreatic/Liver/Gastrointestinal Luminal Tract Disorders. Arch Pathol Lab Med. 2023 May 3. doi: 10.5858/arpa.2022-0462-RA. Epub ahead of print. PMID: 37134268.