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本文刊登于《中国实用妇科与产科杂志》2024,40(1)：74-84
DOI：10.19538/j.fk2024010117
【引用本文】全慧霞，林仲秋.妇科肿瘤人表皮生长因子受体2相关研究进展及检测方法［J］.中国实用妇科与产科杂志2024,40(1)：74-84.
作者：全慧霞，林仲秋
作者单位：中山大学孙逸仙纪念医院妇产科，广东 广州 510120
通讯作者：林仲秋，电子信箱：lin-zhongqiu@163.com
1985年，King等［1］首次发现人类乳腺癌DNA中存在人表皮生长因子受体2（HER2）基因的扩增。随后陆续有多项相关研究发现，HER2基因扩增在乳腺癌的发生、发展中起重要作用；抗HER2药物可提高HER2阳性乳腺癌患者的无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）。对于HER2阳性实体肿瘤的治疗，中国已经获批上市的药物包括传统的抗HER2单克隆抗体（如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、伊尼妥单抗等）、酪氨酸激酶抑制剂（如拉帕替尼、吡咯替尼、奈那替尼等）和抗体偶联药物（antibody-drug conjugate，ADC）［如恩美曲妥珠单抗（TDM-1）、维迪西妥单抗（RC48）、德曲妥珠单抗（T-DXd）］三大类别［2］。2007年美国临床肿瘤学会（ASCO）/美国病理学医师学院（CAP）首次公布乳腺癌HER2检测指南，最新更新为2023年版［3-4］。2016年ASCO/CAP/美国临床病理学会（ASCP）首次公布胃癌HER2检测指南，最新更新为2018年ASCP版［5-6］。2021年，中国第一个原研HER2-ADC维迪西妥单抗（RC48）经中国国家药品监督管理局（NMPA）批准上市，适应证为HER2中高表达［免疫组化（IHC） 2+或 3+］晚期胃癌和尿路上皮癌，且无需进行荧光原位杂交（FISH）或原位杂交（ISH）检测，进一步拓展了HER2表达患者临床治疗获益人群。同期，《中国尿路上皮癌人表皮生长因子受体2检测临床病理专家共识》 ［7］发布，填补了国内外泌尿领域HER2检测的空白，指导了临床中HER2-ADC维迪西妥单抗（RC48）的应用［8］。迄今为止，尚未见妇科肿瘤相关指南中有指导HER2检测的方法。多项研究表明，HER2阳性或表达妇科肿瘤患者可从抗HER2药物中获益。
1.1 子宫内膜癌 2014年Buza等［9］发现，通过IHC检测，子宫内膜癌的HER2过表达率在14%～80%，由FISH检测的HER2扩增率为21%～47%。探及原因，可能与研究样本量不同、肿瘤的临床病理特征、IHC染色和评分方法差异等有关。虽然多篇研究发现HER2过表达和扩增与子宫内膜癌不良预后有关，但抗HER2药物对子宫内膜癌是否获益一直存在争议。Villella等［10］对2例IHC 3+的子宫内膜浆液性癌患者予以曲妥珠单抗治疗，1例完全缓解（CR），1例病情稳定（SD）；但Fleming等［11］对33例HER2过表达（IHC 2+或3+）或HER2扩增［FISH检测HER2与CEP17比值（HER2/CEP17）≥2.0］的子宫内膜癌患者予以静脉滴注曲妥珠单抗单一治疗，未观察到明显的抗肿瘤活性，该研究未发现抗HER2药物明显抗肿瘤活性的原因可能是由于纳入人群病理组织类型多样、有一半人群是ISH阴性导致的。Fader等［12-13］将61例晚期或复发HER2阳性子宫内膜浆液性癌患者随机分配接受卡铂-紫杉醇（对照组）和卡铂+紫杉醇+曲妥珠单抗（试验组）治疗6个周期，随后使用曲妥珠单抗直至疾病进展或出现不可接受的毒性，结果显示中位无进展生存期（mPFS）为8.0个月（对照组）vs. 12.6个月（试验组）［风险比（HR）0.44，90% CI 0.26～0.76，P =0 .005］，中位总生存期（mOS）为24.4个月（对照组）vs. 29.6个月（试验组）［HR 0.58，90% CI 0.34～0.99，P ＜ 0.046］；在他们的研究中，HER2阳性指的是IHC 3+或2+和ISH阳性，IHC评分标准参照的是2007年ASCO/CAP乳腺癌评分标准指南。随后，2019年美国国立综合癌症网络（NCCN）指南将曲妥珠单抗纳入子宫内膜浆液性癌的推荐药物中。子宫内膜浆液性癌有自己的HER2阳性检测标准。表1展示了不同癌组织的最新评价标准。
DP-02研究分别在2023 ASCO年会和2023 欧洲肿瘤内科学会（ESMO）年会上报道了HER2-ADC（T-DXd）治疗HER2表达实体瘤患者的中期结果，在子宫内膜癌系列中，IHC 3+的客观缓解率（ORR）达75%，mPFS未达到，IHC 2+的ORR为40%，mPFS为8.5个月。据此，2024 新版NCCN子宫肿瘤指南已将T-DXd纳入HER2阳性患者二线治疗的推荐。值得注意的是，该研究中HER2 IHC检测标准采用的是胃癌（ASCO、CAP 2016）的标准。
1.2 卵巢癌 HER2基因扩增和（或）HER2蛋白过表达存在于18%～35%的黏液性卵巢癌中［14-15］。2014年Chao等［14］采用2013年ASCO/CAP更新的乳腺癌HER2检测标准，通过IHC和FISH检测对49例黏液性卵巢癌组织进行分析，发现黏液性卵巢癌中HER2阳性的发生率为9/49（18.37%）。有趣的是，IHC和FISH结果的总体一致性为100%。对于浆液性卵巢癌，大多数研究表明，HER2扩增或过表达的发生率较低（在2%～4%之间）［16-17］。一项Meta分析发现，在5000多例卵巢癌中，HER2过表达与OS和PFS降低相关，提出HER2过表达可能可作为预后不良的生物标志物［18］。在卵巢癌患者接受曲妥珠单抗靶向治疗的研究中，抗肿瘤活性较低［19］。对于HER2过表达的卵巢癌患者，传统的抗HER2药物无明显治疗效果。
DP-02临床研究中期结果显示，在卵巢癌系列中，T-DXd在IHC 3+的ORR达63.5%，mPFS为12.5个月，IHC 2+的ORR为36.6%，mPFS为4.1个月。2024 NCCN指南暂未更新，未推荐T-DXd用于卵巢癌的治疗。2023年ASCO大会期间公布了布拉格3.0（PRaG3.0）研究的初步结果，该研究纳入接受维迪西妥单抗（RC48）联合放疗、免疫检查点抑制剂（ICI）治疗的HER2表达（包括IHC 1+～3+）的晚期实体瘤患者，包括6例HER2 IHC表达妇科肿瘤患者中，ORR达66.7%，其中4例卵巢癌患者，有2例患者达到部分缓解（PR），1例患者出现疾病进展（PD），1例患者为SD ［20］。由此可见，新一代HER2-ACD（RC48和T-Dxd）对HER2 IHC 1+～3 +卵巢癌具有良好的抗肿瘤活性。
1.3 子宫颈癌 Itkin等［21］通过Meta分析得出，在遵从ASCO/CAP标准的研究和不遵从ASCO/CAP标准的研究中，子宫颈癌HER2免疫组化过表达的估计总发生率分别为5.7% （95% CI 1.5%～11.7%）和27.0% （95%CI 19.9%～34.8%）（P＜0.001）；估计HER2扩增的发生率分别为1.2%（95%CI 0 ~ 5.8%）和24.9%（95% CI 12.6% ~ 39.6%）（P = 0.004）。Xiang等［22］对1015例侵袭性子宫颈癌通过Sanger测序来评估ERBB2、KRAS和PIK3CA突变，发现3.15%的患者检测到原发性ERBB2突变，其中，腺癌4.52%（7/155）、腺鳞癌7.59%（6/79）和神经内分泌癌10.34%（3/29）的ERBB2突变率显著高于鳞癌的2.14%（16/749）（P= 0.004，Fisher精确概率检验）。此外，ERBB2突变的子宫颈癌患者预后往往比野生型或PIK3CA突变的子宫颈癌患者差，但比KRAS突变的子宫颈癌患者预后好。治疗方面，Monk等［23］开展的晚期/复发性子宫颈癌Ⅱ期临床试验发现，Pazopanib 组PFS和OS延长，Pazopanib和Lapatinib的中位OS分别是50.7周和39.1周，不过，此研究未区分HER2状态。一项2期SUMMIT试验发现，Neratinib治疗HER2突变的转移性子宫颈癌显示一定抗肿瘤活性，PR为25%（95%CI 5.5%～57.2%）［24］。
虽然传统的抗HER2单抗药物对子宫内膜浆液性癌和子宫颈癌有一定的疗效，但对于其他类型的子宫内膜癌、卵巢癌未见明显的抗肿瘤活性，且对子宫颈癌的疗效也并非显著，似乎抗HER2药物在妇科肿瘤中并没有像在乳腺癌、胃癌那么有效。近2年，STATICE和DP-02研究推出的抗HER2治疗新一代ADC药物让我们看到抗HER2-ADC药物新的魅力和潜力。STATICE研究为一项Ⅱ期临床研究，用HER2-ADC（T-DXd）治疗复发子宫癌肉瘤，结果发现HER2免疫组化中高表达组（IHC≥2+）和HER2免疫组化低表达组（IHC 1+）的ORR分别为54.5% （95% CI 32.2 ~ 75.6）和70.0% （95% CI 34.8 ~ 93.3），mPFS分别为6.2和6.7个月［25］；DP-02研究中期结果显示，在子宫颈癌队列中，HER2-ADC（T-DXd）在IHC 3+的ORR达75.0%，mPFS未达到，IHC 2+的ORR为40.0%，mPFS为4.8个月，总体人群mPFS为7.0个月。2024 NCCN子宫颈癌指南已将T-DXd纳入HER2免疫组化中高表达患者的二线治疗的推荐［26］。2023年ASCO大会公布的PRaG3.0研究初步结果中，2例HER2表达子宫颈癌患者，有1例患者达到CR，1例患者PR［20］。由此可见，新一代HER2-ACD（RC48和T-Dxd）药物对HER2免疫组化表达（IHC 1+～3 +）子宫颈癌具有良好的抗肿瘤活性。
1.4 HER2在妇科肿瘤的表达和预后关系 2023年，Uzunparmak 等［27］对4701例实体瘤患者中HER2表达情况进行IHC 检测分析，发现在妇科肿瘤中，HER2免疫组化表达（IHC 1+～3 +）的人群占比远高于传统HER2阳性（IHC 3+，IHC 2+/FISH+）人群，在子宫内膜癌、卵巢癌和子宫颈癌中HER2免疫组化表达（IHC 1+～3 +）比例分别为59.1%、37.6%和35.7%，其中HER2免疫组化低表达（IHC 1+或2+）人群占比分别为46.5%、32.9%和21.4%。
无论在子宫内膜癌、卵巢癌还是子宫颈癌中的腺癌和腺鳞癌，HER2表达似乎都与不良预后相关。一项纳入483例子宫内膜癌患者的大型队列研究中的IHC和FISH评估结果显示，与HER2阴性患者相比，HER2阳性患者的疾病特异性生存期（DSS）、PFS、OS分别降低42%、62%和42%；亚组分析中，Ⅲ/Ⅳ期子宫内膜癌患者的DSS、PFS、OS分别降低26%、57%、23%；子宫内膜样子宫内膜癌患者对应数值是15%、40%、14%［28］。一项纳入34项研究（5180例卵巢癌患者）的Meta分析结果显示：HER2阳性在卵巢癌患者中与更严重的OS显著相关（HR = 1.57，95% CI 1.31～1.89，H2 = 1.7），无病生存期（DFS） / PFS的合并HR和95% CI合并分析显示HER2阳性组患者的疾病进展风险增加（HR = 1.27，95% CI 1.04～1.56）［18］。一项临床前病理研究使用IHC分析229例子宫颈癌患者肿瘤组织（包括194例腺癌和35例腺鳞癌）的HER2表达情况，单变量分析检测出HER2阳性和不良预后之间存在相关性趋势（P=0.07），按HER2表达阴性、中度、过表达的分层K-M分析显示，HER2过表达与更差的预后相关（P=0.014）［29］。
1.5 目前国内已获批上市治疗实体瘤的ADC药物 近年来，恩美曲妥珠单抗、维迪西妥单抗和德曲妥珠单抗3个靶向HER2的ADC药物在中国获批上市，主要用于治疗HER2阳性或过表达的乳腺癌、胃癌和尿路上皮癌。在妇科肿瘤领域，3种药物面向全球和中国的多项临床研究正在进行中［30-31］。
维迪西妥单抗和德曲妥珠单抗在妇科肿瘤领域的临床研究当前已取得部分进展，见表2。
2.1 样本要求 用于HER2检测的样本类型分别有肿瘤组织、细胞学标本、ctDNA、sHER2 ECD。组织标本需包含没有明显坏死、黏液及炎性病变的癌细胞。根据ASCO/ACP乳腺癌指南，从组织采集到固定的时间应尽可能短；用于HER2检测的样品需在10%中性缓冲福尔马林液中固定6～72 h，细胞学标本必须用福尔马林固定，样品应在适当的大体检查和边缘指定后，每隔5～10 mm切片，并放置在足够体积的中性缓冲福尔马林液中，这一过程中若出现特殊情况需记录在报告中。用于HER2检测的组织切片最好不超过6周［32］；用ctDNA进行检测时，可采集患者的血浆或血清，最好采用EDTA抗凝真空采血管或者血液保存管（如Streck管或其Cell-Free DNA BCT保存管）。为了避免裂解的白细胞中释放的基因组DNA造成污染，EDTA管从抽血到血浆提取建议不超过2 h，血液保存管不超过3 d［33］。
2.2 检测方法 HER2主要检测方法见表3。
2.2.1 检测HER2 DNA突变扩增的方法 用于评估HER2突变扩增的方法主要有Sanger测序、高通量测序技术（NGS）、扩增阻滞突变系统PCR （ARMS-PCR）、数字PCR、多重连接依赖探针扩增（MLPA）、FISH。
Sanger测序为第一代测序，或者叫“双脱氧终止法”测序，Sanger测序只是针对单个基因突变、缺失、插入的检测，通量低，成本贵。
NGS是在传统的Sanger测序方法基础上发展起来的，可以一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定。NGS检测准确率高、可重复性强，但对样本的肿瘤纯度要求较高、实验条件要求高、操作复杂、耗时长。如样品中肿瘤纯度＜25%，则检测HER2中拷贝数改变的灵敏度可能会降低［34］。NGS 检测在实验室硬件设置和人员资质方面，比传统PCR实验室有更高的要求。因此，目前还不能在更多的医院广泛应用，更多的是由第三方检测机构提供检测服务。
ARMS-PCR是通过设计2条引物，其3′端碱基分别与突变和正常的模板碱基互补，从而将有某种点突变的模板与正常模板区分开来，此方法灵敏度高、特异度高、操作简单、可重复性高，但是无法检测未知基因突变［35］。
数字PCR与ARMS-PCR类似，但是数字PCR是一种核酸分子绝对定量技术，而ARMS-PCR只是相对定量，dPCR灵敏度高、样本需求量低，但是操作繁琐、系统成本高，对肿瘤含量高的标本没有明显优势［36］。
MLPA是通过探针和靶序列DNA进行杂交，之后通过连接、PCR扩增、毛细管电泳分离，最后收集数据、分析数据后得出DNA中的拷贝数变化（CNV）。它是一种高通量、针对待测核酸中靶序列进行定性和定量分析的检测技术，可以同时检测多达50种核苷酸序列的拷贝数变化，并且可以检测小于60bp的片段。Moerland等［37］使用MLPA进行HER2检测，结果显示FISH和MLPA检测HER2基因扩增的总体一致性为98%（45/46）。虽然MLPA分析快速、准确、便宜，但MLHA也是只能检测已知致病变异中的点突变，以及无法保存细胞形态来区分异质性。
FISH的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列，将荧光标记的核酸片段（探针）与组织、细胞或染色体上待测DNA互补配对，结合成专一的核酸杂交分子，通过荧光检测系统将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。目前进行HER2基因状态检测的探针多为同时含有HER2基因和该基因所在的第17号染色体着丝粒（CEP17）序列的双探针，也可采用仅含有HER2基因的单探针。由于HER2的平均拷贝数容易受多种因素影响，如异常染色体拷贝数、癌细胞的有丝分裂指数、样本的切片厚度等，因此，临床工作中多采用HER2/CEP17来反映HER2扩增情况。虽然FISH价格昂贵、耗时较长，但FISH通常被认为是一种更可靠、敏感和可重复的HER2检测技术［38］。因此，在临床工作中，当IHC 2+时需要进行FISH检测明确是否是HER2阳性，具体的评分标准如表2。近年来逐渐出现了FISH的替代测定方法如亮场ISH方法，如显色ISH （CISH）、银增强ISH （SISH，即单色SISH测定）和双色ISH（即双色ISH），由于可视化是使用标准的亮场显微镜完成的，因此可以同时分析基因拷贝数和组织的形态特征，但技术要求和设备要求高，很多实验室缺乏相应设备。
2.2.2 检测HER2 mRNA扩增的方法 mRNA检测，实时（RT）-qPCR等新方法已被用于检测HER2 mRNA的数量。目前，有一种名为HistoSonda （Cenbimo，Lugo，Spain）的试剂盒可用于检测乳腺癌样本中HER2基因转录的mRNA。在Bernet等［39］的研究中，CISH和HistoSonda在乳腺癌组织中HER2检测的总体一致性为89%。虽然该方法简便、快速、特异性高、性价比高，但存在mRNA降解问题影响结果判定。
2.2.3 检测HER2蛋白质过表达的方法 目前检测HER2蛋白质过表达的检测方法有IHC、质谱（mass spectrometry ，MS）、反相蛋白阵列技术（revers phase protein microarray， RPPA）。
IHC是以抗原抗体结合为基础的半定量方法。Hscoring系统和ASCO/CAP等指南推荐将免疫组化作为检测乳腺癌、胃癌、肠癌、NSCLC等实体肿瘤中HER2表达的标准方法。由于不同癌组织的HER2过度表达的特点不同，不同癌组织评价HER2阳性标准也不同，大多数需根据癌组织的病理特点及多项临床试验结果来制定对应的HER2阳性标准。表2总结了不同癌组织最新HER2 免疫组化评价标准。虽然免疫组化检测简单易行，但很多因素会影响IHC的检测结果，导致可重复性差，如组织固定、固定时间、使用包埋组织、报告阳性结果的阈值的选择以及病理医生能力经验差异可能会影响检测的质量。尽管IHC和ISH已被FDA批准用于确定乳腺癌中HER2的状态，但它们通常需要组合来确认HER2状态，根据Kaufman等［40］的研究结果，只是单用一种方法检测HER2，假阴性率为4.0%。
MS是用电场和磁场将运动的离子按它们的质荷比分离后进行检测的定量分析方法，准确检测生物样品中蛋白质及多肽的相对分子质量、氨基酸序列及翻译后修饰。在早期，由于膜蛋白的疏水性和蛋白水解抗性可能会影响HER2检测结果的准确性，所以使用MS检测运用非常少。但2018年Zhou等［41］运用适体肽探针和液相色谱串联质谱法来使HER2信号转化为报告肽水平，从而避免这个问题，研究结果显示这种方法与IHC和FISH的结果高度一致。
RPPA是将组织或细胞裂解液等样本以微阵列的形式打印到固相基底上，然后用特异性抗体检测样本中的蛋白，样本类型可以是微生物、细胞系或者人肿瘤组织。RPPA具有样本通量高，检测蛋白种类广，检测灵敏度高、可获得定性和定量数据等特点。更重要的是，RPPA可以作为蛋白质生物标志物验证的强大验证工具，因为它的测定间差异最小。缺点是周转时间相对较长，需要复杂的实验工作流程［42］。Williams等［43］利用RPPA检测妇科恶性肿瘤中HER2是否阳性，发现RPPA和传统的IHC 检测一样敏感。
靶向HER2的PET-CT显像可用于监测全身病灶的HER2表达情况，监测HER2表达的异质性，同时也可用于靶向治疗的疗效预测。放射性核素标记HER2黏附体分子探针（radionuclide-labeled HER2 affibody）近年来在卵巢癌的诊断和治疗中显示出广阔的应用前景。Tano等［44］发现，分子探针［177Lu］Lu-HP16具有最高的肿瘤/肾摄取比，是一种很有前景的靶向治疗HER2阳性卵巢癌的分子探针。此方法无创、准确和安全，但是HER2在卵巢癌中的表达阳性率较低，靶向HER2受体的核医学分子探针不适合直接用于卵巢癌的筛查和诊断，但可作为IHC或FISH的重要补充手段。此方法缺点是标记方法可导致亲脂性增加，常常导致与正常组织脱靶相互作用并与血液蛋白结合［45］。另一个缺点可能是细菌来源的蛋白质支架会导致患者反复使用中增加免疫原性的风险［46］。
2.2.4 外周血检测 目前通过外周血检测补充HER2检测结果或监测疾病进展、复发的标志物有sHER2 ECD、ctDNA。
sHER2 ECD为细胞表面HER2蛋白胞外段受蛋白酶裂解脱落进入血液循环后形成的，目前检测sHER2 ECD方法有酶联免疫吸附试验（ELISA），ELISA是美国食品药品监督管理局（FDA）于2000年批准的第一个血清HER2检测方法，其原理是将抗原或抗体结合在固相载体表面，利用抗原抗体的特异性结合和酶催化特定底物发生显色反应，实现目标物检测。ELISA是一种快速、简单、无创的定量检测方法，但是多项研究提示组织HER2（tHER2）与 血清 HER2 ECD（sHER2 ECD）水平无相关性，由于证据不足，2016年美国临床肿瘤学会提出不建议临床医生用sHER2 ECD水平来指导他们对HER2阳性乳腺癌患者的辅助治疗选择［47］。因此，目前利用ELISA检测sHER2 ECD水平仅可作为组织检测的补充，同时用于监测HER2状态在疾病进展过程中或治疗后的动态变化。
ctDNA为肿瘤细胞释放到血液中DNA，随血液在全身循环。Page等［48］研究发现，68例原发性乳腺癌治疗后患者中有8例检测到HER2 ctDNA（cfDNA））扩增，30例转移患者中有5例检测到ctDNA扩增，但在22例原发性乳腺癌患者和98例健康女性对照中未检测到ctDNA扩增，这说明ctDNA可为HER2阳性转移乳腺癌患者的潜在标志物。目前检测ctDNA方法有NGS、数字PCR等，检测方法简便、无创，有助于肿瘤患者的动态监测［49］。
目前大多数实体肿瘤指南或临床研究都以IHC和FISH作为HER2的主要检测手段，把IHC作为基础的检测方法，只有当IHC 2+时才需要进行FISH检测。但是近几年新一代ADC药物对于HER2 IHC 1+或2+/FISH非扩增（HER2低表达）的实体肿瘤的良好抗肿瘤活性，不得不让研究者们思考新的检测方法来判断HER2表达状态。因为当使用IHC来检测时，严格区分IHC 0和IHC 1+对临床病理科医生来说存在一定难度和一定的主观性，Fernandez等［50］研究显示HER2 IHC 0和IHC 1+之间判读一致性较差（一致性仅仅26%）。因此，为了提高HER2判读的准确性，多项研究致力于探索更敏感、定量检测的HER2评估检测方法。近年来人工智能的快速发展，其强大的图像分析功能有望成为病理科医生强大的助手。Dobson等［51］研究发现，图像分析（Image analysis）可以可靠准确地评估免疫组化染色组织中HER2的状态，其一致性为91%。Onsum等［52］使用自动定量分析（AQUA）可以在单细胞水平上评估组织切片中HER2的表达和异质性；除此之外，NGS及数字PCR不仅可以检测HER2的扩增水平，还可以检测HER2基因突变、缺失等情况，而且，当用于检测ctDNA时，还可以降低HER2低表达可能存在异质性的影响。
免疫组化IHC、荧光原位杂交FISH和二代基因测序NGS是目前临床上常规可及的HER2检测方法。这些检测方法各有优缺点。免疫组化IHC检测方法是目前临床病理常规使用的检测方法，临床病理科开展较简单，费用低廉，目前在妇科恶性肿瘤研究中主要采用乳腺癌或胃癌判读标准。虽然，DP-02和/PRaG3.0研究包含了子宫颈癌和卵巢癌等妇科肿瘤患者，都采用了胃癌的判读标准。但是，妇科肿瘤组织类型众多复杂，是否需要以组织类型而不是以器官来制定相关的判读标准值得进一步研究。同时，以维迪西妥单抗（RC48）为代表的新一代HER 2-ADC药物对HER2免疫组化IHC 1+妇科肿瘤患者也有很好的疗效。因此，传统病理免疫组化为标准的区分HER2高、中、低表达的方法也需要调整。荧光原位杂交FISH检测方法用于检测HER2基因扩增状态，检测可靠、敏感和可重复好，但价格较昂贵、耗时较长。二代基因测序NGS检测方法用于检测HER2基因突变和扩增状态，但样本肿瘤纯度要求较高、价格昂贵、实验条件要求高、操作复杂。综合分析，免疫组化IHC应该是目前最适合临床应用的一种检测方法，在确定统一判读标准和利用AI图形辅助诊断技术后，将会是今后的主要检测方法。HER2胞外段血清学检测（HER2 ECD）将是今后的发展方向，若突破了技术瓶颈，使其达到或接近组织学样本的准确度，则更方便其临床应用。因为组织学样本受到时间和空间异质性的影响，且复发患者并非均可取得近期组织样本，血清学样本则随时可及，也更方便。
HER2-ADC药物（RC48和T-Dxd）的出现使得抗HER2药物在妇科肿瘤治疗中获得新的突破，未来还需要制定妇科肿瘤HER2检测临床应用指南，并且开展更多临床研究来验证疗效。（参考文献略）
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